微透析仪器操作步骤(仅供参考)
1. 去除老鼠头皮,清洁头盖骨。在头盖骨上面选定的位置(参看定位仪图谱)打小洞(用精密高速钻机MF5360,钻头MF5176----这个孔洞用于放探针底座),这个小洞需要打穿头盖骨。
2. 在这个孔洞的附近打2-3个孔(使用钻头MF5362),用于安装螺丝MF5182,目的是增加探针底座的与头盖骨的粘合力,使探针底座不容易脱落。
3. 重要的是:需要精确选准探针埋置的部位,才能够得到最多的微透析样品。使用立体定位仪MD3000,把探针底座(MD2251或者MD2250)埋入上面的孔洞里面。用粘和剂MD1300固定探针底座和螺丝。
4. 使用立体定位仪把探针(例如MD2200)插入探针底座。
5. 根据实验需要,选择泵控制器(例如MD1020)的流速。把泵控制器上面的连接扁线插入泵(MD1001)的插孔。
6. 在注射器(例如MDN0100)中灌入实验需要的液体,放在泵架子上面。在这个泵上面,只可以放1个注射器。如果需要放2—3个注射器,可以购买注射器架子MD1002 ,在MD1002上面放2—3个注射器。
7. 把老鼠放入清醒系统MD1404的笼子内。在老鼠身体上面放项圈MF5371,把清醒系统里面的钩子,钩住MF5371,所以,当老鼠走动的时候,这个钩子也转动,同时,上面的光电传感器向仪器发出老鼠走动的信号,仪器就会使清醒系统的底盘转动,当然,这个转动是与老鼠走动的方向相反,得到最最重要的结果----使老鼠身体上面的2个管子(输液管子和透析液管子)不会缠绕、堵塞,使2个管子里面的液体流动畅通。
8. 用管子MF5164与接头MD1510连接注射器----探针,探针的另外1个接口用管子和接头连接到恒温冷冻收集器MD1201等。
9. 检查各种连接无误。
10. 开通清醒系统控制器电源。
11. 在恒温冷冻收集器里面放置收集管,开通恒温冷冻收集器电源,设置恒温冷冻收集器5个参数。
12. 开通泵控制器电源,微透析仪器开始工作。
建议
微透析实验与许多实验不同,很多方面取决于操作者的技能水平。
1. 埋置探针的部位要准确。埋置探针的深度也要准确。选择探针的膜长度需要合适。目的是得到最多的微透析样品。
2. 操作探针需要细心,需要避免探针膜的损坏,从而延长探针的寿命和使用次数。
3. 探针使用前的处理。以及在使用间隔时候的处理,冲洗,浸泡..,目的也是延长探针的寿命和使用次数。
4. 在连接注射器、探针、液体选择开关、自动恒温冷冻收集仪,等等系统的时候,需要细心,连接管、接头,与上述物件,套/插 时候,一方面,需要防止漏液和堵塞,另一方面,也要防止连接管和接头的损坏。
5. 探针,连接管,接头,是消耗品,细心、正确的操作方法,能够延长它的使用寿命好次数。
6. 灌流液体的配制,流速的选择。自动恒温冷冻收集仪的参数(延时时间,收集时间,间隔时间,等)选择。等等,都需要学习和自己经验的积累总结。尤其是埋置探针,是得到微透析液体的重要步骤,操作者的手法非常重要。
要使实验成功,操作者的技能水平的重要性,比仪器本身还要重要。优秀的操作者,容易得到微透析液,量多质好,消耗品(探针、连接管、接头)的使用寿命长、次数多。